Determinación del efecto neuroprotector de trans-resveratrol y ácido p-cumárico en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y mediante la técnica de captación de rojo neutro

Abstract

El envejecimiento es el principal factor de riesgo en el desarrollo de enfermedades neurodegenerativas cuya etiopatogenia continúa siendo desconocida y para las que no existen terapias farmacológicas que permitan frenar o revertir su progresión. La hipótesis del calcio (Ca²⁺) postula que aquellos factores que contribuyen a mantener la homeostasis de este ión podrían ser neuroprotectores. En esta tesis se estudió el efecto de trans- resveratrol (t-RV), y su precursor ácido p-cumárico (p-CA), sobre la viabilidad de células de neuroblastoma humano SH-SY5Y, muertas por sobrecarga de Ca²⁺ inducida por glutamato o ionomicina. La viabilidad celular (VC) fue medida mediante la técnica de captación de rojo neutro. En el tratamiento continuo (24 h de preincubación más 24 h en presencia del insulto de muerte) t-RV (10ˉ¹⁰ M) protegió a las células frente a glutamato (5 mM), mientras que t-RV (10ˉ¹² M; 10ˉ¹⁰ a 10ˉ⁶ M) las protegió frente a ionomicina (2 μM). Mediante un tratamiento equivalente p-CA protegió a las células a todas las concentraciones probadas (10ˉ¹² M; 10ˉ¹⁰ a 10ˉ⁶ M). En ausencia de preincubación (tratamiento conjunto), t-RV protegió frente a glutamato (5 mM) a 10ˉ¹², 10ˉ¹⁰, 10̄ˉ⁹, 10̄ˉ⁸ M y frente a ionomicina (2 μM) a 10ˉ¹², 10ˉ¹⁰ 10̄ˉ⁹, 10̄ˉ⁸, 10¯⁷ M, mientras que p-CA protegió a 10ˉ¹², 10ˉ¹⁰ y 10ˉ⁹ M. t-RV provocó muerte a concentraciones altas (pIC₅₀: 4,578  0,1750 con glutamato 5 mM y pIC₅₀: 4,763 ± 0,1240 con ionomicina 2 μM). Queda pendiente dilucidar los mecanismos por los cuales t-RV y p-CA fueron capaces de ejercer efectos neuroprotectores. Este trabajo aporta evidencias acerca del potencial de estos fitoquímicos en la prevención y/o tratamiento de enfermedades neurodegenerativas.El envejecimiento es el principal factor de riesgo en el desarrollo de enfermedades neurodegenerativas cuya etiopatogenia continúa siendo desconocida y para las que no existen terapias farmacológicas que permitan frenar o revertir su progresión. La hipótesis del calcio (Ca²⁺) postula que aquellos factores que contribuyen a mantener la homeostasis de este ión podrían ser neuroprotectores. En esta tesis se estudió el efecto de trans- resveratrol (t-RV), y su precursor ácido p-cumárico (p-CA), sobre la viabilidad de células de neuroblastoma humano SH-SY5Y, muertas por sobrecarga de Ca²⁺ inducida por glutamato o ionomicina. La viabilidad celular (VC) fue medida mediante la técnica de captación de rojo neutro. En el tratamiento continuo (24 h de preincubación más 24 h en presencia del insulto de muerte) t-RV (10ˉ¹⁰ M) protegió a las células frente a glutamato (5 mM), mientras que t-RV (10ˉ¹² M; 10ˉ¹⁰ a 10ˉ⁶ M) las protegió frente a ionomicina (2 μM). Mediante un tratamiento equivalente p-CA protegió a las células a todas las concentraciones probadas (10ˉ¹² M; 10ˉ¹⁰ a 10ˉ⁶ M). En ausencia de preincubación (tratamiento conjunto), t-RV protegió frente a glutamato (5 mM) a 10ˉ¹², 10ˉ¹⁰, 10̄ˉ⁹, 10̄ˉ⁸ M y frente a ionomicina (2 μM) a 10ˉ¹², 10ˉ¹⁰ 10̄ˉ⁹, 10̄ˉ⁸, 10¯⁷ M, mientras que p-CA protegió a 10ˉ¹², 10ˉ¹⁰ y 10ˉ⁹ M. t-RV provocó muerte a concentraciones altas (pIC₅₀: 4,578 ± 0,1750 con glutamato 5 mM y pIC₅₀: 4,763 ± 0,1240 con ionomicina 2 μM). Queda pendiente dilucidar los mecanismos por los cuales t-RV y p-CA fueron capaces de ejercer efectos neuroprotectores. Este trabajo aporta evidencias acerca del potencial de estos fitoquímicos en la prevención y/o tratamiento de enfermedades neurodegenerativas.